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整体课题表包服务

一、整体课题（严谨真实、了局靠得住）

1. 高通量基因筛�。河酶咄坎庑颉⒒蛐酒� CRISPR/Cas9 文库进行关键基因筛选。
真核转录组测序、表显子组测序、基因表白谱芯片、miRNA 测序/芯片

m6A 甲基化测序、lncRNA 测序/芯片、单细胞转录组测序、iTRAQ 蛋白质组定量

Nat Commun. 2016 Apr 6;7:11215.

2. 基因调控：用病毒或质粒载体介导基因过表白、敲除或滋扰，能够实现对基因表白的上调或下调。
过表白质粒、滋扰质粒、CRISPR/Cas9 质粒

腺有关病毒（AAV）、慢病毒（LV）、腺病毒（ADV）、逆转录病毒（RV）

3. 细胞水平验证：在细胞水平验证基因的职能，蕴含细胞增殖、细胞迁徙与侵袭、细胞凋亡、细胞周期等。

J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.

4. 动物体内尝试：通过构建动物模型检测基因水平变动后引起的指标变动，蕴含皮下成瘤、原位成瘤、大幼等。

J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.

5. 作用机造钻研：进一步挖掘出与关键基因有关的信号通路或其它基因，蕴含双萤光素酶检测、RNA pull-down、BioID、CO-IP 等。

J Hepatol. 2018 Jun;68(6):1214-1227.

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二、神经整体课题（团队专业、服务完善）

1. 疾病模型构建：专业提供慢性痛、脑卒钟注抑郁、神经退行性疾病、癫痫等神经系统动物疾病模型的构建。

Cichon J et al.,Bio Protoc.2018；Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Jul 11;114(28):E5673-E5682.

2. 环路示踪：借助病毒载体的示踪技术，可实现对全脑、核团、环路、细胞、单细胞及亚细胞器的象征，从复杂的神经环路到高分辨率的单神经元状态，成立完善的示踪系统。

Cell Stem Cell. 2020 Mar 5;26(3):331-345.e6.

3. 元件操控：通过病毒载体和脑定位注射技术可实现基因过表白、基因寡言、光遗传学、化学遗传学的精准特异性操控。

Science. 2018 Oct 26;362(6413):429-434.

4. 表型筛选及变动：闯辗视到细胞再到行为的一站式服务，蕴含 WB、qPCR、电生理、病理、免疫组化、行为学尝试。

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三、m6A 甲基化课题（思路设计、服务完善）

1. 预尝试：找到与 RNA 甲基化有关的酶是否有差距表白或检测整体 m6A 水平，用 qPCR、WB、组织芯片、质谱检测等，再进行甲基化酶敲低、敲除和过表白细胞尝试和动物尝试。

Song H et al. Autophagy. 2019；Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254

2. 通过 m6A-seq 测序，能够知路哪些基因在 RNA 甲基化建饰上有差距,再结合转录组测序，发现差距基因的表白水平变动。

Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254

3. 获得 RNA 甲基化建饰的主张基因后，再对 m6A 甲基化进行建复，观察位点建复正常后对细胞表型和幼鼠成瘤及大幼的影响。

Huang H et al. Nat Cell Biol. 2018

4. 进一步挖掘甲基化酶通过哪些通路对主张基因进行调控或蛋白互作技术挖掘蛋白，蕴含蛋白与 DNA 或 RNA 互作、蛋白与蛋白互作、靶基因验证等。

Chen M. et al. (2018) Hepatology, 67(6): 2254

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四、表泌体钻研课题（经验丰硕、质量靠得住）

1. 表泌体分离：差速超速离心法能够获得高质量、高纯度的表泌体，因而被以为是分离步骤中的「金尺度」，也是高分文章中常选的分离步骤。

2. 表泌体鉴定：常用的鉴定步骤蕴含透射电镜（TEM）、纳米粒径跟踪分析（NTA）、Western Blot（WB）标志物检测等。

ACS Nano. 2019 Feb 26;13(2):2450-2462.

3. 高通量分析：表泌体内含有与细胞起源有关的核酸和蛋白质，能够传递 mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、蛋白质等进入受体细胞，参加细胞间通讯。

Cell Commun Signal. 2019 Aug 16;17(1):96.

4. 表泌体示踪：常用亲脂性染料对表泌体进行象征，重要蕴含两类，一是 PKH67（绿色）和 PKH26（红色），二是 DiO（绿色）、DiI（橙色）和 DiR（深红）。

Oncol Rep. 2012 Nov;28(5):1551-8；2019 Oct 29;19(1):1015.

5. 体内表职能钻研：将象征的表泌体与受体细胞共造就，观察细胞职能变动，再将表泌体注射入动物模型中，观察成瘤大幼，并检测有关指标。

Nat Commun. 2018 Jan 15;9(1):191.